Russian Federation
Russian Federation
Saratov, Saratov, Russian Federation
Saratov, Saratov, Russian Federation
The present research features a new biotechnological approach for complex processing of secondary cereal products. The approach makes it possible to obtain new functional foods and ingredients, such as carbohydrate-protein concentrate, dietary fiber concentrates, biologically active substances, polyphenols, and xylo-oligosaccharides. The complex biotechnology involves oat bran biotransformation and includes chemical, hydrothermal, and enzymatic methods of extraction, which allows manufacturers to obtain functional ingredients with antioxidant and prebiotic properties. The concentrates obtained as a result of the study contained a significant amount of protein, hydrolysis products of polysaccharides (glucose, maltodextrins), and free polyphenols. The experiment produced concentrates of biologically active substances containing xylo-oligosaccharides and phenolic compounds. The content of polyphenols was 67% of the total amount in oat bran, protein – 6.9%, carbohydrates – 80.7% xylo-oligosaccharides whith prebiotic properties 35.3%–71.5%, and ash 11.3%. The obtained data indicated a high antioxidant activity of polyphenol extracts. The differences in antioxidant activity between various methods of extraction are associated primarily with the completeness of extraction and the stability of the extracted phenolic compounds. Ultrasonic treatment proved beneficial for the extraction kinetics and the polyphenol yield at the initial stage, with an increase in antioxidant properties. As for the antioxidant activity of polyphenol concentrate during storage, the research did not reveal changes for 8 months at a temperature of 20 ± 1°C and a relative humidity of 70 ± 5%. The study of the growth dynamics of Lactobacillus acidophilus and Bifi obacterium bifi um in media containing xylo-oligosaccharide concentrate confirmed the presence of prebiotic properties and their selectivity. The accumulation of biomass of prebiotic cultures occurred faster with the use of nutrient media with the use of xylo-oligosaccharide concentrate and lactulose, as compared with milk. Thus, the research confirmed the feasibility of biotechnology for transforming oat bran into functional ingredients, which makes it possible to use them in new technological solutions for products with bifidogenic properties.
Phytosubstance, prebiotics, xylooligosaccharides, secondary products of grain processing
Введение
Современная концепция здорового питания предполагает повышение биологической ценно- сти пищевых продуктов путем введения функ- циональных ингредиентов (биокорректоров), являющихся источниками важных биологически ак- тивных веществ (БАВ). Сбалансированные функцио- нальные продукты питания предназначены не только для обеспечения организма человека необходимыми питательными веществами и энергией, но и для под- держания здоровья за счет снижения риска возникно- вения заболеваний. Одним из приоритетов мировой политики в области здорового образа жизни является необходимость устранения дефицита микро- и макро- элементов в рационе человека [12–15].
Вторичные продукты переработки зерна бога- ты источниками физиологически функциональных ингредиентов, биотрансформация которых позво- лит получить ряд БАВ с различной химической природой и широким спектром физиологических эффектов. Суммарное содержание полифенолов до- статочно полно установлено в овощах, фруктах, специях, напитках. Согласно литературным данным лидерами среди источников полифенолов являют- ся: специи – гвоздика, мята, бадьян, содержащие от 15188 до 5460 мг/100 г полифенолов, и ягоды – аро- ния черноплодная, бузина черная, голубика, черная смородина, содержащие от 1756 до 758 мг/100 г по- лифенолов [1, 6]. Однако последние исследования показали, что общее содержание фитовеществ и ан- тиоксидантная активность цельного зерна недооце- нена в литературе. Большинство фенольных веществ содержится в связанном состоянии в зерновых: 85 % в зерне кукурузы, 76 % в зерне пшеницы и 75 % в овсе. Согласно литературным данным альтернатив- ным сырьевым источником для получения полифе- нолов могут служить цельнозерновые злаки, общее содержание полифенолов в которых находится на- равне с традиционными сырьевыми источниками
фенольных антиоксидантов – ягодами. Так коли- чество полифенолов в пшенице может доходить до 1459 мг/100 г, в рисе – до 313 мг/100 г, во ржи – до 255 мг/100 г [2, 3, 5].
Фитовещества зерновых включают антиокси- данты, которые сконцентрированы во внешней обо- лочке зёрен злаковых культур, где их содержание достигает 80 % от общего количества в зерне. Это обуславливает рост объёмов производства для насе- ления хлебных продуктов из цельнозерновой муки или с добавлением отрубей, а также интенсивное использование нативных антиоксидантов в других целях [10, 11, 20]. Зерновые отруби также содержат ксилановые полисахариды, которые могут быть пре- образованы в ксилоолигосахариды (КОС). Много- численные исследования препаратов КОС показали многообразие биологических свойств, проявляемых этой группой углеводов. Они антиканцерогенны, подавляют активность патогенных и энтерогнилост- ных кишечных бактерий, антигиперлипидемичны, проявляют митогенную, антиоксидантную и пре- биотическую активность, а также выступают в роли противовоспалительных и антиаллергических аген- тов. Однако важнейшим свойством КОС является их пребиотическая активность – избирательное стиму- лирование роста пробиотической микрофлоры ки- шечника человека [7–9].
Проблема комплексной переработки вторичных зерновых ресурсов является актуальной и требует научно обоснованных технологических решений. Особенно в свете того, что Россия – крупнейший импортер зерна. Это обуславливает насущную не- обходимость его глубокой переработки и созданию линейки качественных и безопасных продуктов и ингредиентов функциональной направленности. Настоящее исследование связано с разработкой тех- нологии комплексной переработки вторичного зер- нового сырья путем биотрансформации зернового полимерного комплекса клеточных стенок отрубей
Битюкова А. В. [и др.] Техника и технология пищевых производств. 2019. Т. 49. № 1 С. 5–13
гидротермическим, химическим и ферментативны- ми методами. Таким образом, цель исследования
- разработка биотехнологии функциональных ин- гредиентов из вторичных зерновых продуктов для расширения ассортимента функциональных продук- тов питания.
Объекты и методы исследования
Для получения экстрактов предварительно из- мельченные отруби заливали дистиллированной водой в соотношении 1/10 и гомогенизировали в течение 30 мин с помощью погружного гомогени- затора ULAB US-4102 при 6000 об/мин. При гидро- термическом методе экстракции отруби подвергали ультразвуковому воздействию в лабораторной уль- тразвуковой ванне «Сапфир 2,5» (35 кГц, 30 мин, температура 50 °С). Полученную суспензию термо- статировали при 55 °С в течение 3,5 ч. Далее, цен- трифугировали (4000 об/мин в течение 20 минут) на лабораторной центрифуге UC-1536E и отделяли супернатант.Послепромывкидистиллированнойводой и центрифугирования при тех же условиях осадок повторно подвергали гидролизу: гидромодуль в аце- татном буфере (рН 4,0) как 1:10; гомогенизация в течение 30 мин УЗВ (35 кГц, 60 мин, температура
60 °С); термостатирование полученной суспензии при 55 °С в течение 3,5 ч; промывка и отделение супернатанта центрифугированием; экстракция остаточных количеств полифенолов из осадка, от- ношение осадка к этиловому спирту как 1:1; гомо- генизация в течение 30 мин при 6000 об/мин, и УЗВ (35 кГц, 30 мин, температура 30 °С); объединение и концентрирование супернатантов второй и третей стадий экстракции на испарителе ротационном ИР- 1М3 при температуре 60 ± 5 °С в разряженной сре- де до конечной влажности 30 ± 2 %. Таким образом, был получен концентрат биологически активных ве- ществ (БАВ).
При ферментативном методе экстракции измель- ченные отруби обрабатывали ферментными пре- паратами «Амилолюкс А» – а-амилазой (0,01 % к массе отрубей) и «Глюколюкс А» – глюкоамилазой (0,006 % к массе отрубей) в ацетатном буферном растворе (рН = 5) в соотношение 1:100 и гомогени- зировали в течение 30 мин. Полученную суспензию подвергали термостатированию при 55 °С в тече- ние 33,0 ч. Через 2,5 ч после начала термостати- рования вносили ферментный препарат протеазы («Протосубтилин ГЗ А», 0,005 % к массе отрубей). По окончании процесса гидролиза полученную су- спензию нагревали до 100 ± 2 °С в течение 10 мин для инактивации ферментов. Жидкую фазу отделя- ли центрифугированием при 4000 об/мин в течение
20 мин. Осадок промывали три раза дистил- лированной водой и снова подвергали цен- трифугированию. Твёрдый осадок подвергали ферментативному гидролизу при гидромодуле 1:10 в ацетатном буфере (рН = 4) α-1,4-глюкогидролазой с амилолитической активностью 4000 ед./г (фер- ментные препараты «Целлолюкс А», «Амилолюкс А», «Глюкаварин Г18Х»), обладающей ферулоэсте-
разной, гемицеллюлазной, ксилазной и целюлазной активностями, в течение 4,5 часов при 55 °С. По окончании экстракции ферменты инактивировали кипячением в течение 10 мин с последующим разде- лением фракций центрифугированием (4000 об/мин,
20 мин). Полученный таким образом суперна- тант концентрировали на ротационном испарителе при температуре 60 ± 5 °С до конечной влажности 30 ± 2 %.
В отличие от предыдущих методов экстракции при химическом методе предварительно измель- ченные отруби подвергали гидратированию в 0,2М водном растворе соляной кислоты в соотноше- нии 1:10 и последующей гомогенизации в течение
30 мин. Полученную суспензию термостати- ровали дважды в течение 60 мин при 55 °С. По окончаниитермостатирования отделяли супер- натант центрифугированием (4000 об/мин в течение 20 минут). Осадок промывали дистилли- рованной водой и центрифугировали при тех же условиях. К нерастворимому осадку добавляли дистиллированную воду (1:10) и доводили до рН 4,0 с помощью ледяной уксусной кислоты. Далее, вносили 22 г химически чистого хлорида натрия (NaCl) и термостатировали в течение 8 часов при 55 °С. После завершения данного процесса гидро- лизат центрифугировали (4000 об/мин в течение
20 минут) и отделяли супернатант. Осадок про- мывали трижды дистиллированной водой и отде- ляли надосадочный слой центрифугированием. Полученные таким образом супернатанты объеди- няли и концентрировали до конечной влажности 30 ± 2 %.
Для получения концентрата полифенолов и КОС проводили спиртовую экстракцию полученных кон- центратов. Соотношение сиропа к этанолу (98 %)
- 1:3. Вследствие воздействия этанола на сироп про- исходит разделение фракций, растворение в водном растворе спирта фенольных соединений и осаж- дение КОС. Центрифугирование при 5000 об/мин в течение 25 минут позволяет в полной мере раз- делить фракции двух независимых сред. Надоса- дочный спиртовой слой жидкости, состоящий из антиоксидантов на основе фенольных соединений, концентрировали до конечной влажности 30 % и за- тем лиофильно высушивали до конечной влажности 8 ± 1 %.
Исследование пребиотических свойств кси- лоолигосахаридов, полученных путем био- модификации овсяных отрубей, проводили согласно ГОСТ 10444.11-89 [17]. Для установле- ния пребиотических свойств были использованы штаммы микроорганизмов Lactobacillus acidophilus (L. acidophilus) и Bifi obacterium bifi um (B. bifi um). Выращивание пребиотических культур проводили на стандартных средах с добавлением исследуемых пребиотиков (ксилоолигосахаридов и смесь БАВ, состоящую из ксилоолигосахаридов и полифено- лов) из расчета 2 % массовой доли в культуральной жидкости в течение 72 часов. В качестве контро- ля использовали стандартную питательную среду
Bityukova A.V. et al. Food Processing: Techniques and Technology, 2019, vol. 49, no. 1, pp. 5–13
с добавлением лактулозы и обезжиренного моло- ка. Массовая доля вносимой стартерной культуры составила 2 %. Определение количество клеток микроорганизма L. acidophilus проводили соглас- но ГОСТ 10444.11-2013 [16]. Метод подсчета клеток микроорганизма B. bifidum осуществляли согласно МУК 4.2.999-00 [18].
Результаты исследований и их обсуждение
В настоящее время перспективным направлени- ем в совершенствовании технологий переработки вторичных продуктов растительного сырья, вклю- чая зерновые, является создание новых биотехноло- гических подходов, основанных на использовании ферментных препаратов и усовершенствованной гидротермической обработки, в частности ульт- развукового воздействия (УЗВ), позволяющего ин- тенсифицировать процесс экстракции. Для каждой конкретной биотехнологии необходимо научно обо- сновать выбор ферментных препаратов или техно- логические параметры УЗВ с учётом специфичности к компонентам сырья, оптимальных параметров их действия, а также схемы последовательности воздей- ствия на биополимерный комплекс сырья с целью получения различных промежуточных продуктов, которые могут иметь самостоятельное физиологиче- ское действие на организм человека.
В связи с вышеперечисленным на первом эта- пе исследований изучали был изучен химический состав овсяных отрубей, как наиболее важных вто- ричных продуктов переработки зерна. Отруби овса представляют собой материал клеточных стенок, содержащий ценные макронутриенты (белок, крах- мал и пищевые волокна) и комплекс фитовеществ с антиоксидантными свойствами (фенольные кис- лоты, флавоноиды, полифенолы, кумарины и т. д.). Благодаря этому отруби имеют огромный потенци- ал для применения в составе продуктов питания. Однако сегодня незначительная часть производи- мых отрубей в РФ потребляется в составе пищевых продуктов. Путём измельчения и дополнительной гидротермической обработки, регулированных био- модификаций растворимости полимеров матрик- са отрубей диапазон использования их может быть значительно расширен за счет получения новых функциональных пищевых ингредиентов, оказы- вающих физиологическое воздействие на организм человека и животных. Технологические показатели исследуемых отрубей были определены в соответ-
ствии с нормативно-техническими документами. В исследуемых овсяных отрубях, отобранных для эксперимента, содержание пестицидов, токсичных элементов, микотоксинов, зараженность и загрязнён- ность вредителями хлебных запасов и содержание ГМО соответствовало требованием ТР ТС 021/2011
«О безопасности пищевой продукции» [19].
Нами разработаны три метода трансформации многокомпонентного субстрата отрубей для полу- чения продуктов с заданными функциональными свойствами, улучшенными показателями качества при максимальном их выходе (рис. 1). Методология направленного биокатализа предусматривает бо- лее полное использование сырья (отрубей), увели- чение выхода целевых продуктов (полифенолов, гидролизатов гемицеллюлоз, углеводно-белковых концентратов, пищевых волокон, экстрактов пре- биотической и антиоксидантной направленности) с заданными функциональными свойствами, а также решение экологических проблем за счет замены кис- лотного и щелочного гидролиза.
Физико-химический состав углеводно-белковых концентратов, полученных после первого этапа ги- дролиза, состоящих из продуктов гидролиза крах- мала и белка, представлен в таблице 1.
Анализируя данные таблицы 1, можно сделать вывод, что влияние метода экстракции на процесс извлечения продуктов гидролиза белков и углеводов незначительно и не превышает границы абсолют- ной погрешности измерений при доверительной ве- роятности P = 0,95 по соответствующим методикам испытаний. Углеводно-белковые концентраты харак- теризуется как продукты, содержащие значительное количество белка и продуктов гидролиза – полиса- харидов (глюкоза, мальтодекстрины). Кроме этого, в углеводно-белковых концентратах содержится от 0,06 % до 0,08 % свободных полифенолов (ПФ).
В ходе исследований были получены кон- центраты БАВ, содержащие КОС и фенольные соединения (табл. 2). Полученные концентраты, по- мимо полифенолов, содержание которых доходило до 67 % от общего их количества в овсяных отрубях (1,5 ± 0,2 %), также включают: белок до 6,9 %, угле- воды до 80,7 %, в том числе КОС, обладающие пре- биотическими свойствами – 35,3 % до 71,5 %, и золу 11,3 %. Внешний вид концентрата полифенолов
– мелкокристаллический порошок светло-желтого либо светло-коричневого цвета с ванильно-зерно- вым запахом. Осажденные этанолом КОС аналогич-
Таблица 1 – Физико-химический состав углеводно-белковых концентратов в абсолютно сухом веществе (в а.с.в).
Table 1 – Physico-chemical composition of carbohydrate-protein concentrates in absolutely dry matter
|
Физико-химические показатели |
Углеводно-белковый концентрат |
||
|
Гидротермический метод |
Химический метод |
Ферментативный метод |
|
|
Влажность, % |
29,8 |
30,2 |
30,5 |
|
Сырой протеин в а.с.в, % |
39,5 |
40,3 |
40,1 |
|
Углеводы (общие) в а.с.в,% |
55,3 |
52,9 |
55,1 |
|
Зола в а.с.в, % |
4,6 |
5,0 |
4,5 |
|
Полифенолы в а.с.в, % |
0,06 |
0,07 |
0,07 |
Битюкова А. В. [и др.] Техника и технология пищевых производств. 2019. Т. 49. № 1 С. 5–13
Рисунок 1 – Технологическая схема комплексной переработки зерновых с получением экстрактов пребиотической и антиоксидантной направленности
Figure 1 – Technological scheme of complex processing of grain with obtaining prebiotic and antioxidant extracts
но подвергают высушиванию в сушильном шкафу до конечной влажности 8 ± 1 %. При этом получают мелко дисперсный порошок светло-коричневого цве- та с незначительным зерновым запахом.
Пребиотики – неусваиваемые пищевые ингре- диенты, способствующие пролиферации и адсо- рбции бифидо- и лактобактерий в кишечнике [4]. К ним относят лактулозу, лактосахарозу, галакто-, фрукто-, изомальтоолигосахариды, лизоцим, дрож- жевые экстракты, низко-осахаренную кукурузную патоку, ячменно-солодовый экстракт, гидролизаты
казеина и сывороточных белков, муцин, пантетин, лактоферрин и другие [5, 11]. Были проведены ис- следования пребиотической активности полученных экстрактов с помощью ферментативного гидролиза. Для установления пребиотических свойств были ис- пользованы штаммы микроорганизмов Lactobacillus acidophilus и Bifi obacterium bifi um.
Согласно данным, представленным на рисунке 2, количество клеток L. acidophilus на среде с добавле- нием концентрата КОС составило 2,8 × 1011 КОЕ/см3 на 3 сутки культивирования. Этот показатель на
Таблица 2 – Физико-химический состав концентратов БАВ
Table 2 – Physical and chemical composition of biologically active concentrates
|
Метод экстракции |
Влажность, % |
Протеин в а.с.в, % |
Зола в а.с.в, % |
Углеводы: |
ПФ, в а.с.в, % |
|
|
КОС в а.с.в, % |
Остаточные углеводы в а.с.в, % |
|||||
|
Гидротермический метод |
31,2 |
6,7 |
10,9 |
35,3 |
45,3 |
1,0 |
|
Химический метод |
30,6 |
6,3 |
10,5 |
60,4 |
22,2 |
0,7 |
|
Ферментативный метод |
29,4 |
5,9 |
10,3 |
71,5 |
11,0 |
0,8 |
Bityukova A.V. et al. Food Processing: Techniques and Technology, 2019, vol. 49, no. 1, pp. 5–13
(а) (б)
Рисунок 2 – Динамика роста микроорганизма (а) L. acidophilus и (б) B. bifidum культивировании на различных средах
Figure 2 – The dynamics of (a) L. acidophilus and (b) B. bifidum in various media
2,4 × 1011 КОЕ/см3 больше, чем в числе колоний, вы- росших на обезжиренном молоке. При дальнейшем культивировании количество клеток L. acidophilus не увеличивалось. Число колоний В. bifidum на 3 сутки на среде с добавлением концентрата КОС составило 1,9 × 1011 КОЕ/см3, что на 1,7 × 1011 КОЕ/ см3 превышает число колоний, выросших на обе- зжиренном молоке. Дальнейшее культивирование не приводило к увеличению биомассы микроорганиз- ма В. bifidum. Показано, что полученные экстракты различными методами проявляли пребиотическую активность, сравнимую с известным пребиотиком лактулозой.
Известно, что производные гидроксибен- зойной и гидроксикоричной кислот, входящие в состав полифенольных соединений, обладают высо- кими антиоксидантными свойствами. Антирадикаль- ная активность (АРА или АОА) полифенолов отрубей определяли методом АРА, основанном на реакции стабильного свободного радикала 2,2’-дифенилпи- крилгидразила с подвижный атомом водорода или электроном в спиртовом растворе исследуемого ве- щества. Массовая доля вносимых полифенолов в ре- акционную среду составляла 30, 20, 10 и 5 мг/см3 [4].
Данные таблицы 3 свидетельствуют о высокой антиоксидантной активности полученных полифено- лов. Различия в антиоксидантной активности между разными методами экстракции связаны с полнотой
извлечения и стабильностью извлекаемых феноль- ных соединений. Установлено, что ультразвуковая обработка улучшает кинетику экстракции и выход полифенолов на начальной стадии. При этом потре- бляется меньше энергии, чем при обычной экстрак- ции, а антиоксидантная активность полученного экстракта повышается. Результаты исследования по изменению показателя антиоксидантной активности (антирадикальной активности) концентрата полифе- нолов в процессе хранения не выявили ее изменений в течение 8 месяцев при температуре 20 ± 1 °С и от- носительной влажности воздуха 70 ± 5 %.
Таким образом, подтверждена целесообразность глубокой переработки вторичных зерновых про- дуктов с получением экстрактов пребиотической и антиоксидантной направленности. Исследования подтвердили значительный бифидогенный эффект полученных экстрактов, что открывает перспективы их использования в технологии синбиотичних про- дуктов питания.
Выводы
В результате экспериментальной работы ис- следован потенциал вторичного зернового сырья в качестве источника получения эссенциальных ком- понентов, а именно полифенолов и ксилоолигоса- ридов. В результате изучения влияния трех видов экстракции на процесс извлечения биологически ценных веществ из овсяных отрубей были получены углеводно-белковый концентрат, концентраты БАВ,
Таблица 3 – Антиоксидантная активность препаратов полифенолов из овсяных отрубей
Table 3 – Antioxidant activity of oat bran polyphenol preparations
|
Концентрация препарата ПФ, мг/см3 |
Антиоксидантная активность, у.е.а./ см3 |
||
|
Механический |
Химический |
Ферментативный |
|
|
30 |
1052,0 |
965,2 |
1130,0 |
|
20 |
865,4 |
752,7 |
921,1 |
|
10 |
408,0 |
344,1 |
493,6 |
|
5 |
158,6 |
121,8 |
270,2 |
Битюкова А. В. [и др.] Техника и технология пищевых производств. 2019. Т. 49. № 1 С. 5–13
КОС и полифенолов. Изучение физико-химических и биологических свойств полученных ингредиентов также указало на целесообразность применяемых технологий экстракции. Углеводно-белковые кон- центраты характеризуются как продукты, содер- жащие значительное количество белка и продуктов гидролиза полисахаридов (глюкоза, мальтодекстри- ны). Концентраты БАВ, помимо полифенолов, со- держание которых доходило до 67 % от общего их количества в овсяных отрубях, также включали: бе- лок до 6,9 %, углеводы до 80,7 %, в том числе КОС от 35,3 % до 71,5 %, и золу 11,3 %. Подтвержден пре- биотический эффект концентратов КОС по величине
стимулирования роста и развития пробиотических культур микроорганизмов. Кроме этого, доказана антиоксидантная активность концентратов полифе- нолов, не меняющаяся в течение 8 месяцев. В резуль- тате исследования экспериментально обоснована технология комплексной переработки зернового сы- рья, в частности овсяных отрубей, для получения БАВ, обладающих рядом положительных биологи- чески активных свойств.
Конфликт интересов
Авторы заявляют об отсутствии конфликта инте- ресов.
1. Chlopicka J, Pasko P, Gorinstein S, Jedryas A, Zagrodzki P. Total phenolic and total flavonoid content, antioxidant activity and sensory evaluation of pseudocereal breads. LWT - Food Science and Technology. 2012;46(2):548-555. DOI: https://doi. org/10.1016/j.lwt.2011.11.009.
2. Dwivedia S, Sahrawat K, Puppala N, Ortiz R. Plant prebiotics and human health: Biotechnology to breed prebiotic-rich nutritious food crops. Electronic Journal of Biotechnology. 2014;17(5):238-245. DOI: https://doi.org/10.1016/j.ejbt.2014.07.004.
3. Gibson GR, Rastall RA. Prebiotics: Development and Application. England: John Wiley and Sons Ltd; 2006. 256 p. DOI: https://doi.org/10.1002/9780470023150.
4. Gorbunova N, Bannikova A, Evteev A, Evdokimov I, Kasapis S. Alginate-based encapsulation of extracts from beta Vulgaris cv. beet greens: Stability and controlled release under simulated gastrointestinal conditions. Lwt-Food Science and Technology. 2018;93:442-449. DOI: https://doi.org/10.1016/j.lwt.2018.03.075.
5. Hole AS, Grimmer S, Jensen MR, Sahistrom S. Synergistic and suppressive effects of dietary phenolic acids and other phytochemicals from cereal extracts on nuclear factor kappa B activity. Food Chemistry. 2012;133(3):969-977. DOI: https://doi. org/10.1016/j.foodchem.2012.02.017.
6. Kaprelyants L, Zhurlova O. Biotechnological approaches for the production of functional foods and supplements from cereal raw materials. Food Science and Technology. 2014;27(2):15-19.
7. Kaprelyants L, Zhurlova O. Technology of wheat and rye bran biotransformation into functional ingredients. International Food Research Journal. 2017;24(5):1975-1979.
8. Kaprelyants LV, Voloshenko OS, Zhurlova ED. Bioaktivnye soedineniya i pishchevye volokna v novykh razrabotannykh zernovykh produktakh [Bioactive Compounds and Dietary Fibre in Advanced Cereal Products]. Grain Products and Mixed Fodder’s. 2012;47(3):17-21. (In Ukr.).
9. Kaur R, Ahluwalia P, Sachdev PA, Kaur A. Development of gluten-free cereal bar for gluten intolerant population by using quinoa as major ingredient. Journal of Food Science and Technology-Mysore. 2018;55(9):3584-3591. DOI: https://doi.org/10.1007/ s13197-018-3284-x.
10. Perales-Sánchez JXK, Reyes-Moreno C, Gomez-Favela MA, Milan-Carrillo J, Cuevas-Rodriguez E, Valdez-Ortiz A, et al. Increasing the Antioxidant Activity, Total Phenolic and Flavonoid Contents by Optimizing the Germination Conditions of Amaranth Seeds. Plant Foods for Human Nutrition. 2014;69(3):196-202. DOI: https://doi.org/10.1007/s11130-014-0430-0.
11. Reddy SS, Krishnan C. Production of prebiotics and antioxidants as health food supplements from lignocellulosic materials using multienzymatic hydrolysis. International Journal of Chemical Sciences. 2010;3(3)535-549.
12. Roberfroid MB. Prebiotics and probiotics: are they functional foods? American Journal of Clinical Nutrition. 2000;71(6):1682S-1687S. DOI: https://doi.org/10.1093/ajcn/71.6.1682S.
13. Singh RD, Banerjee J, Arora A. Prebiotic potential of oligosaccharides: A focus on xylan derived oligo-saccharides. Bioactive Carbohydrates and Dietary Fibre. 2015;5(1):19-30. DOI: https://doi.org/10.1016/j.bcdf.2014.11.003.
14. Tungland BC, Meuer D. Nondigestible Oligo - and Polysaccharides (Dietary Fiber): Their Physiology and Role in Human Health and Food. Comprehensive Reviews in Food Science and Food Safety. 2002;1(3):73-92. DOI: https://doi. org/10.1111/j.1541-4337.2002.tb00009.x.
15. Waters DM, Mauch A, Coffey A, Arendt EK, Zannini E. Lactic Acid Bacteria as a Cell Factory for the Delivery of Functional Biomolecules and Ingredients in Cereal-Based Beverages: A Review. Critical Reviews in Food Science and Nutrition. 2015;55(4):503-520. DOI: https://doi.org/10.1080/10408398.2012.660251.
16. State Standard 10444.11-2013. Microbiology of food and animal feeding stuffs. Methods for detection and enumeration of mesophilic lactic acid bacteria. Moscow: Standartinform; 2014.
17. State Standard 10444.11-89. Food products. Methods for determination of the lactic acid bacteria. Moscow: Standartinform; 2010.
18. MUK 4.2.999-00. Opredelenie kolichestva bifidobakteriy v kislomolochnykh produktakh [Recommended Practices No.4.2.999-00 Mesuring the amount of bifidobacteria in fermented milk products].
19. TR TS 021/2011. Tekhnicheskiy reglament Tamozhennogo soyuza “O bezopasnosti pishchevoy produktsii” [RP of the Customs Union 021/2011. Technical regulations of the Customs Union “On food safety”]. 2011.
20. Tutelyan VA, Lashneva NV. Biologically active substances of plant origin. Flavonols and flavones: prevalence, dietary sourses and consumption. Problems of Nutrition. 2013;82(1):4-22. (In Russ.).
