Введение В    последние    годы    как    у    нас    в    стране,    так    и    за    рубежом,    активно    ведутся    научные    исследования    по    улучшению    пищевой    ценности    продуктов    пищевого    и    кормового    назначения.    Одним    из    решений    в    этом    направлении    является    возможность    использования    новых    источников    натуральных    компонентов,    содержащих    ценные    макро-    и    микронутриенты,    а    также    биологически    активные    соединения.    Особый    интерес    представляют    соя    и    продукты    ее    переработки,    использующиеся    в    различных    отраслях    экономики    [1].    Сою    выращивают    в    основных    земледельческих    регионах    90    стран.    Мировое    производство    ее    достигает    300    млн.    тонн.    Успешное    продвижение    обусловлено    как    ее    огромными    возможностями    в    пищевой    индустрии,    так    и    агрономическими    и    даже    экологическими,    по    сравнению    с    другими    сельскохозяйственными    культурами.    Согласно    принятой    Целевой    отраслевой    программе    «Развитие    производства    и    переработки    сои    в    Российской    Федерации    на    период    2014– 2020    гг.»    в    последние    годы    существенно    расширились    посевные    площади    под    соей    в    России.    Главным    регионом    производства    сои    в    нашей    стране    является    Дальний    Восток,    где    сконцентрировано    70    %    
 ее    посевов.    Существенно    расширяются    посевные    площади    и    в    Центральном    регионе    России.    Так,    если    в    2000    г.    объемы    производства    сои    составляли    
 340    тыс    тонн,    то    уже    в    2010    г.    достигли    1    млн.    тонн,    а    в    2018    г.    превысили    3,6    млн.    тонн.    Российская    соя    ценится    как    внутри    страны,    так    и    на    мировом    рынке,    т.    к.    она    выращивается    из    семян,    не    являющихся    генетически    модифицированными    [2]. Известны    две    основные    технологии    переработки    соевых    семян.    В    первой    получают    соевое    масло    и    
шрот,    который    затем    перерабатывают    в    изоляты,    концентраты,    текстураты    и    другие    продукты.    При    второй    соевые    бобы    подвергают    измельчению    и    водной    обработке    с    получением    соевого    молока    и    окары.    При    растущем    спросе    на    соевые    продукты    молочного    типа    актуальной    является    проблема    использования    побочного    продукта    ее    переработки    –    окары,    которая    содержит    комплекс    ценных    пищевых    компонентов    [3–6].    Состав    соевой    окары    может    меняться    в    зависимости    как    от    исходного    состава    соевых    семян,    так    и    от    способа    их    переработки.    Она    содержит    (%    на    сухое    вещество):    белок    –    18–24,    жиры    –    10–13,    углеводы    –    13–39,    клетчатку    –    17–25,    витамины    и    минералы,    среди    которых    преобладают    калий,    фосфор,    кальций,    магний,    железо    –    1046,    396,    260,    163    и    6,2    мг%    (мг    на    100    г)    соответствен- но    [7].    Соевый    белок    окары    обладает    высокой    влагоудерживающей    способностью,    хорошей    жиросвязывающей    способностью    и    высокими    эмульсионными    свойствами.    Содержит    в    своем    составе    16    аминокислот,    в    том    числе    все    незаменимые,    и    отличается    высокой    степенью    усвояемости.        Соевая    окара    представляет    собой    влажную    массу    без    выраженного    особого    вкуса    и    запаха    из-за    чего    находит    широкое    применение    в    производстве    как    пищевых    продуктов,    так    и    кормов    для    животных.    При    частичном    замещении    пшеничной    муки    на    соевую    окару    предлагают    производить    хлебобулочные    и    мучные    кондитерские    изделия    функционального    назначения    с    улучшенными    органолептическими    и    физико-химическими    показателями    [8–12].    При    включении    продуктов    переработки    сои    в    состав    мучных    изделий    повышается    содержание    белка    и    токоферолов    [13].    Применение    окары    в    производстве    макаронных    изделий    позволило    получить    продукт     повышенной    пищевой    ценности    за    счет    улучшения    аминокислотного    состава    белкового    нутриента    и    повышения    содержания    клетчатки    [14,    15].    Подтверждена    возможность    использования    окары    в    композиционных    рецептурах    мясных    изделий    лечебно-профилактической    направленности    с    высокими    функционально-технологическими    харак- теристиками    в    отношении    кишечной    микрофлоры,    а    также    образования    стабильных    эмульсий    и    гелей    [7,    16].    Введение    окары    в    рацион    животных    оптимизирует    белковый    обмен    и    повышает    иммунную    резистентность    их    организмов    [17–19].    Поскольку    окара    –    это    побочный    продукт    водной    обработки    сои,    то    жирорастворимые    витамины,    как    и    гидрофобные    соединения,    остаются    в    ней.    Соя    богата    токоферолами    природного    происхожде- ния    [20,    21].    Они    обладают    антиоксидантной    активностью    и    более    физиологичны    для    ферментной    системы    живых    организмов,    по    сравнению    с    синтетическими    антиокислителями,    что    позволяет    при    включении    ее    в    состав    других    продуктов    уменьшить    дозировку    синтетических    антиоксидантов    (бутилгидрокситолуол,    бутилгидроксианизол,    про- пиллгаллат    и    трет-бутилгидрохинон),    безопасность    которых    ставится    под    сомнение    современными    исследованиями    [22–24].    В    связи    с    этим    изучение    витаминного    состава    соевой    окары,    а    именно    содержания    токоферолов,    является    актуальным.    Антиоксидантная    способность    соевой    окары    исследовалась    в    [25,    26].    Литературные    данные    по    содержанию    токоферолов    в    семенах    сои    отличаются.    Это    обусловлено    генетическими    особенностями    ее    сортов,    агроклиматическими    условиями    выращивания,    технологическими    условиями    переработки    сырья,    а    также    методами    определения    витамина    [27,    28].        Для    определения    токоферолов    используется    метод    высокоэффективной    жидкостной    хроматографии    (ВЭЖХ).    Его    высокая    чувствительность    и    точность    дают    возможность    получить    надежные    результаты.    Этот    метод    позволяет    проводить    одновременное    определение    всех    форм    токоферолов    [29–31].    Однако    не    всегда    удается    добиться    полного    разрешения    пиков,    соответствующих    разным    изомерам    [32].    Для    проведения    ВЭЖХ-анализа    рекомендовано    вести    пробоподготовку    методом    прямой    экстракции    с    использованием    неполярных    растворителей    для    маслосодержащих    объектов    с    небольшим    содержанием    влаги.    Для    прочих    продуктов    –    с    проведением    предварительного    щелочного    высокотемпературного    омыления    образца    и    его    неоднократного    перерастворения.    Последний    вариант    трудоемкий    и    занимает    90    %    затраченного    времени    на    анализ,    а    также    не    исключает    возможности    разрушения    токоферолов    природного    происхождения    и    их    потерю    [33–35]. Целью    настоящей    работы    являлось    определение    токоферолов    в    соевой    окаре    и    подбор    условий    анализа    методом    ВЭЖХ:    опробирование    модифицированного    варианта    подготовки    пробы    и    подбор    элюирующей    системы    с    целью    лучшего    разделения    изомеров    токоферолов. Объекты и методы исследования В    работе    использовали    спектрофотометр    Nano    Drop    2000,    жидкостной    хроматограф    GalaxyVarian    920    LC    с    фотометрическим    и    флуориметрическим    детекторами,    хроматографическую    колонку    Chromsep    HPLC    Column    HPLC    (5    µм,    4,6×250    мм)    или    аналогичную    ей    Agilent    Zorbax    RX-SIL    (5    µм,    4,6×250    мм). В    работе    использовали    стандарты    токоферолов    фирмы    Sigma    Aldrich.    Из-за    чувствительности    токоферолов    к    УФ-излучению    все    операции    выполняли    в    местах,    защищенных    от    сильного    естественного    и    люминесцентного    освещения.    Концентрацию    стандартных    растворов    токоферолов    определяли    спектрофотометрически.    Условия    фото- метрических    измерений    представлены    в    таблице    1.    Расчет    концентрации    растворов    вели    по    удельному    и    по    молярному    коэффициентам    поглощения    (табл.    2).    Убедившись    в    эквивалентности    двух    способов    спектрофотометрического    определения    концентрации    токоферолов    в    растворе,    использовали    средние    значения    концентраций    стандартных    растворов.    Из    растворов    стандартов    был    приготовлен    ряд    градуированных    растворов    токоферолов    для    построения    калибровочных    зависимостей    в    
Таблица    1.    Условия    фотометрических    измерений1 Table    1.    Conditions    for    photometric    measurements1
Токоферолы Молярная    масса,    г/моль Длина    волны,    нм Удельный    коэффициент    поглощения    ε    1%1см    (этанол)
Молярный    коэффициент    поглощения,    ε    (гексан) α- 430,71 292 76 3265 β- 416,69 296 89 3725 γ- 416,69 298 91 3809 δ- 402,66 298 87 3515
1    ГОСТ    EN    12822-2014.    Продукты    пищевые.    Определение    содержания    витамина    Е    (α-,    β-,    γ-    и    δ-токоферолов)    методом    высокоэффективной    жидкостной    хроматографии.    М.    :    Стандартинформ,    2015.    –    25    с.
197
Петрова С. Н. [и др.] Техника и технология пищевых производств. 2020. Т. 50. № 2 С. 194–203
условиях    фотометрического    и    флуориметрического    детектирования,    используемых    для    количественного    определения    форм    токоферола    в    анализируемой    пробе. Для    хроматографических    измерений    выбрана    следующая    буферная    система:    Буфер    А:Гексан;    Буфер    В:Метанол;    Буфер    С:Гексан:1-Хлорбутан    (6:4).    Данная    система    позволяет    лучшее    разделить    изомеры    токоферолов    при    данном    способе    элюирования    
 (табл.    3). В    качестве    объекта    исследования    использовали    соевую    окару.    Пробоподготовку    осуществляли    
методом    прямой    экстракции    в    неполярном    раство- рителе    и    низкотемпературной    обработке,    позво- ляющей    отделить    водорастворимые    соединения,    попавшие    в    гексановый    раствор,    и    другие    вещества,    
 с    температурой    застывания    выше    –70    °С. К    0,5    г    анализируемой    пробы    добавляли    50    мл    
 гексана.    Перемешивали    с    использованием    мультиро- татора    Biosan    Multi    Bio    RS-24.    Отфильтрованный    гексановый    раствор    поместили    в    низкотемпературный    морозильник    на    2–4    ч    при    температуре    –70    °С.    После    выдержки    отбирали    1    мл    гексанового    раствора    и    центрифугировали    его    10    мин    (11    000    об/мин    при    температуре    +3    °С).    Для    анализа    использовали    верхнюю    гексановую    фракцию.    Массовую    долю    изомеров    токоферолов    рассчитывали    по    формуле: Х    =    (Сср    ·    V)/m                                                                                                                (1) где    Х    –    массовая    доля    токоферолов    (мг/кг);    Сср    –    среднеарифметическое    значение    результатов    измерений    площади    пика    анализируемого    компонента    для    трех    параллельных    хроматографических    анализов    испытуемого    раствора    (мкг/мл); V    –    объем    разведения    (мл); m    –    масса    анализируемой    пробы    (г).
Таблица    2.    Концентрации    растворов    изомеров    токоферолов Table    2.    Concentrations    of    solutions    of    tocopherol    isomers
Токоферолы Концентрация расчетная,     мкг/мл
Определяемая    концентрация Среднее    значение    концентрации,     мкг/мл по    удельному    поглощению,    мкг/мл по    молярному    поглощению,    мкг/мл α- 100 104,48 104,48 104,48 β- 100,22 100,01 100,12 γ- 100,66 100,43 100,55 δ- 99,77 99,66 99,72
Таблица    3.    Программа    элюирования Table    3.    Elution    program
Время,    мин
Скорость     потока,    мл/мин
Буфер    А,    %
Буфер    B,    %
Буфер    С,    % 0,0 0,500 60 2 38 10,0 0,500 60 2 38 10,3 0,500 0 80 20 10,7 0,500 0 80 20 11,0 0,500 60 2 38 25,0 0,500 60 2 38
2423222120191817161514131211109876543210
1,300 1,200 1,100 1,000 900 800 700 600 500 400 300 200 100 0 SPW 0.20STH 10000.00
AlfaT
GammaT
DeltaT
RT [min]
ST TOC 1 (9.417 _ 9.675 _ 10.5)260718_2.DATA [FL detector channel]FL units
Рисунок    1.    Хроматограмма    стандартов    токоферолов    (флуориметрический    детектор).     По    оси    абсцисс    –    время    удерживания,    мин;    по    оси    ординат    –    сигнал    детектора,    мВ Figure    1.    Chromatogram    of    tocopherol    standards    (fluorimetric    detector).    X-axis    –    retention    time,    min;    Y-axis    –    detector    signal,    mV
198
Petrova S.N. et al. Food Processing: Techniques and Technology, 2020, vol. 50, no. 2, pp. 194–203
Результаты и их обсуждение Первоначально    исследовали    растворы    стандартов    (рис.    1)    изомеров    токоферола    в    гексане    (регистрировали    не    менее    5    хроматограмм    каждого    раствора).    Время    выхода    изомеров    β-    и    γ-форм    в    данных    условиях    хроматографического    анализа    
совпадало.    Изменение    условий    элюирования    не    позволило    провести    их    разделение.    Поскольку    известно,    что    β-форма    содержится    в    сое    в    количестве    до    5    %    от    суммы    токоферолов,    то    было    решено    вести    расчет    суммарного    количества    β-    и    γ-форм    в    образце    [28,    29].    Время    удержания    (Rt,    мин)    стандартов    токоферолов    представлено    в    таблице    4.    Из    полученных    значений    площадей    хроматографических    пиков    находили    среднее    арифметическое    (использовали    значения,    расхожде- ние    между    которыми    не    превышало    10    %)    и    строили    калибровочные    зависимости    площади    пика    от    концентрации    компонента.    Данный    график    для    α-токоферола    представлен    на    рисунке    2.    Для    других    форм    изомеров    токоферола    калибровочные    зависимости    идентичны.    Уравнения    этих    графиков    представлены    в    таблице    4.        В    соевой    окаре    витамин    Е    находится    в    неэтерифицированной    форме    и    пробоподготовка    с    использованием    высокотемпературного    щелочного    омыления    и    последующего    неоднократного    пере- растворения    пробы    может    привести    к    его    частичному    разрушению    и    потерям.    Поскольку    температура    замерзания    гексана    составляет    –95    °С,    а    температуры    застывания    большинства    триглицеридов    –    до    –20    °С,    
 то    ожидали,    что    после    выдержки    гексанового    раствора    пробы    соевого    продукта    на    холоде    (при    –70    °С)    
 омыляемая    фракция    липидной    составляющей    будет    находиться    в    кристаллическом    состоянии.    При    проведении    подготовки    пробы    соевого    образца    для    анализа    выдерживанием    измельченного    материала    в    гексане    с    последующей    фильтрацией    и    низкотемпературной    выдержкой    наблюдали    четкое    разделение    фаз,    образование    дискретной    жировой    фазы.    Отбирали    верхнюю    часть    гексанового    раствора    и    отделяли    образовавшиеся    кристаллы    центрифугированием.    Для    хроматографического    анализа    использовали    прозрачную    фракцию.    
Таблица    4.    Экспериментальные    данные     для    стандартов    токоферолов Table    4.    Experimental    data    for    tocopherol    standards
Формы    токоферолов
Время    удержа- ния    Rt,    мин
Уравнения калибровочных    графиков α- 8,40–8,60 у    =    34,39х    (R2 =    0,9987) β-        +    γ- 9,40–9,60 у    =    41,25х    (R2 =    0,9996) δ- 10,30–10,50 у    =    49,11х    (R2 =    0,9996)
Рисунок    2.    Калибровочный    график    для    α-токоферола.     По    оси    абсцисс    –    концентрация,    мкг/мл,     по    оси    ординат    –    площадь    пиков Figure    2.    Calibration    graph    for    α-tocopherol.     X-axis    –    the    concentration,    μg/mL;    Y-axis    –    the    peak    area
Рисунок    3.    Хроматограмма    образца    соевого    продукта    (флуориметрический    детектор).     По    оси    абсцисс    –    время    удерживания,    мин;    по    оси    ординат    –    сигнал    детектора,    мВ Figure    3.    Chromatogram    of    a    soy    product    sample    (fluorimetric    detector).    X-axis    –    retention    time,    min;    Y-axis    –    detector    signal,    mV
20191817161514131211109876543210
1,100
1,000
900
800
700
600
500
400
300
200
100
0
AlfaT
GammaT
DeltaT
RT [min]
Valid Toc 3_310718_7_31_2018 6_34_52 PM.DATA [FL detector channel]FL units
Площадь
мкг/мл
199
Петрова С. Н. [и др.] Техника и технология пищевых производств. 2020. Т. 50. № 2 С. 194–203
Предварительно    подобные    обработки    проводили    и    с    гексановыми    растворами    стандартов    токоферолов.    При    этом    образование    кристаллов    не    наблюдали.    Убедились    в    том,    что    описанные    манипуляции    не    оказывают    влияния    на    время    выхода,    высоту    и    площадь    пиков    токоферолов. На    рисунке    3    представлена    экспериментальная    хроматограмма    образца    соевой    окары.    Наблюдаемые    пики    соответствуют    пикам    стандартов.    Время    выхода    пиков    совпадает    со    временем    удержания    стандартных    растворов.    Это    позволяет    сделать    вывод    о    качественном    составе    токоферолов    анализируемого    образца.    Согласно    калибровочным    зависимостям    определено    количественное    содержание    и    процентное    соотношение    токоферолов    в    образце    (табл.    5).    Полученные    значения    совпадают    с    литературными    данными    [28,    36].    В    соевой    окаре    содержание    токоферолов    составило    109    мг%,    что    говорит    о    ее    антиоксидантных    свойствах.    Использование    окары    в    производстве    различных    продуктов    позволит    снизить    долю    синтетических    антиоксидантов.    Предлагаемый    способ    пробоподготовки    позволил    определить    все    формы    токоферолов    в    соевом    продукте.    Он    является    более    экономичным    по    трудозатратам    и    расходу    используемых    реактивов.    Исключается    проведение    высокотемпературного    щелочного    гидролиза    образца,    экстрагирование    токоферолов    гексаном    из    полученного    щелочного    раствора,    промывка    последнего    до    нейтральной    реакции    и    осушение    его    безводным    сульфатом    натрия.    При    этом    уменьшается    риск    выхода    из    рабочего    состояния    хроматографического    оборудования    за    счет    того,    что    низкотемпературная    выдержка    позволяет    отделить    от    гексанового    раствора    токоферолов    омыляемые    фракции    липидов    и    другие,    загрязняющие    колонки,    примеси.    
Выводы В    настоящей    работе    методом    высокоэффективной    жидкостной    хроматографии    определено    содержание    токоферолов    в    соевой    окаре,    представляющей    собой    вторичный    продукт    получения    соевого    молока.    
Предложен    и    опробирован    модифицированный    способ    пробоподготовки    растительного    объекта,    заключающийся    в    обработке    измельченного    биоматериала    гексаном    с    последующей    низкотемпе- ратурной    выдержкой    отфильтрованного    гексанового    раствора    и    центрифугировании.    Предлагаемая    подготовка    образца    позволила    провести    качествен- ное    и    количественное    определение    изомеров    токоферолов    в    природном    материале,    содержащем    неэтерифицированные    формы    витамина    Е.    Также    подготовка    является    менее    трудоемкой    и    экономически    выгодной    с    точки    зрения    расходования    химических    реактивов.    Уменьшается    риск    сбоя    в    работе    хроматографического    оборудования,    поскольку    низкотемпературная    выдержка    позволяет    отделить    от    гексанового    раствора    токоферолов    омыляемые    фракции    липидов    и    другие,    загрязняющие    колонки,    примеси.    Выбор    буферной    системы    позволил    получить    хорошее    разделение    изомеров    токоферолов.    Благодаря    наличию    токоферолов    в    соевой    окаре    использование    ее    как    в    пищевых,    так    и    в    других    целях,    позволит,    кроме    обогащения    другими    полезными    нутриентами,    увеличить    содержание    витамина    Е,    проявляющего    антиоксидантые    свойства,    и    снизить    долю    синтетических    антиоксидантов.    
 
Критерии авторства Все    авторы    внесли    равнозначный    вклад    в    концепцию    представленного    исследования,    в    получение    и    анализ    данных,    а    также    их    интерпретацию.
Конфликт интересов Авторы    заявляют    об    отсутствии    конфликта    интересов.
Благодарности Авторы    выражают    особую    благодарность    руководству    исследовательской    лаборатории    
 ООО    «ИЛ    Тест-Пущино»    в    лице    генерального    директора    В.    М.    Возняка,    а    также    Л.    М.    Винокурову    и    Б.    З.    Елецкой    за    оказанную    помощь    при    проведении    исследования    и    обработку    полученных    результатов.
Таблица    5.    Содержание    токоферолов    в    образце    соевого    продукта Table    5.    Tocopherol    content    in    the    soy    sample
Формы    токоферола
Экспериментальные    данные Литературные    данные    [28,    36] Количество,    мг/кг Процентное    соотношение,    % Количество,    мг/    кг Процентное    соотношение,    % α- 131,1    ±    20 12 75–1000 10,0–13,6 β-    +    γ- 699,1    ±    59 64 β:    0–60 γ:    600–1400 β:    0–1,8 γ:    62–67 γ:    62–67 δ- 262,2    ±    21 24 200–500 19,5–24 Сумма 1092,4    ±    100 100 750–3050 100
200
Petrova S.N. et al. Food Processing: Techniques and Technology, 2020, vol. 50, no. 2, pp. 194–203 Contribution All    authors    made    an    equal    contribution    to    the    concept    of    the    presented    study;    as    well    as    in    obtaining,    analyzing    and    interpreting    the    data.
Conflict of interest The    authors    declare    that    there    is    no    conflict    of    interest    regarding    the    publication    of    this    article.
Acknowledgements The    authors    express    their    sincere    gratitude    to    the    management    of    the    research    laboratory    of    LLC    IL    Test-Pushchino:    the    general    director    V.M.    Voznyak,    
 L.M.    Vinokurov,    and    B.Z.    Yelets    for    the    assistance    provided    during    the    study    and    the    processing    
 of    the    results.
 

1. Linnikov PI. Russian soybean market: trends, development prospects. The Agrarian Scientific Journal. 2018;(10):81-86. (In Russ.). DOI: https://doi.org/10.28983/asj.v0i10.595.

2. Dorokhov AS, Belyshkina ME, Bolsheva KK. Soy production in the Russian Federation: basic trends and development prospects. Vestnik of Ulyanovsk State Agricultural Academy. 2019;47(3):25-33. (In Russ.). DOI: https://doi.org/10.18286/1816- 4501-2019-3-25-33.

3. Statsenko ES, Litvinenko OV. Assessment of technological properties of soybean grain of the FSBSI ARSRI of soybean and its processing products to determine their suitability for use in food production. Bulletin of South Ural State University. Series: Food and Biotechnology. 2019;7(3):31-40. (In Russ.). DOI: https://doi.org/10.14529/food190304.

4. Tao X, Cai YJ, Liu TX, Long Z, Huang LH, Deng XL, et al. Effects of pretreatments on the structure and functional properties of okara protein. Food Hydrocolloids. 2019;90:394-402. DOI: https://doi.org/10.1016/j.foodhyd.2018.12.028.

5. Hu Y, Piao CH, Chen Y, Zhou YN, Wang D, Yu HS, et al. Soybean residue (okara) fermentation with the yeast Kluyveromyces marxianus. Food Bioscience. 2019;31. DOI: https://doi.org/10.1016/j.fbio.2019.100439.

6. Vong WC, Liu SQ. Biovalorisation of okara (soybean residue) for food and nutrition. Trends in Food Science and Technology. 2016;52:139-147. DOI: https://doi.org/10.1016/j.tifs.2016.04.011.

7. Sadovoy VV, Samylina VA. Soevaya pishchevaya okara v kompozitsionnykh retsepturakh myasnykh izdeliy [Soy okara in compositional formulations of meat products]. News institutes of higher Education. Food technology. 2005;284(1):46-48. (In Russ.).

8. Begeulov M. Using soybean okara in bread. Bread products. 2010;(7):40-42. (In Russ.).

9. Fedorova RA. Investigation of the effect on the okara of quality bread. Izvestiya Saint-Petersburg State Agrarian University. 2016;(42):46-51. (In Russ.).

10. Kodirova GA, Kubankova GV. Secondary soy raw material as a component in the production of flour confectionery. Bulletin of KSAU. 2018;141(6):182-186. (In Russ.).

11. Guseva TI, Gulova TI. Obogashchenie sdobnogo pechenʹya soevoy okaroy [Fortification of butter cookies with soy okara]. Sovremennoe khlebopekarnoe proizvodstvo: perspektivy razvitiya - Materialy XVII Vserossiyskoy zaochnoy nauchno-prakticheskoy konferentsii [Modern bakery production: development prospects - Proceedings of the XVII All-Russian Correspondence Scientific and Practical Conference]; 2016; Yekaterinburg. Yekaterinburg: Urals State University of Economics; 2016. p. 116-121. (In Russ.).

12. Park J, Choi I, Kim Y. Cookies formulated from fresh okara using starch, soy flour and hydroxypropyl methylcellulose have high quality and nutritional value. LWT - Food Science and Technology. 2015;63(1):660-666. DOI: https://doi.org/10.1016/j. lwt.2015.03.110.

13. Dotsenko SM, Bibik IV, Kupchak DV, Obukhov EB, Gryzlov VM, Agafonov IV. Technological approach to obtaining and using soybean seed germ fraction in specific foods. Food Processing: Techniques and Technology. 2015;38(3):76-83. (In Russ.).

14. Osipova GA, Samofalova LA, Berezina NA, Seregina TV. Wasteless processing of soy: use soya okara in macaroni manufacture. Legumes and Groat Crops. 2019;29(1):56-62. (In Russ.). DOI: https://doi.org/10.24411/2309-348X-2019-11073.

15. Kang MJ, Bae IY, Lee HG. Rice noodle enriched with okara: Cooking property, texture, and in vitro starch digestibility. Food Bioscience. 2018;22:178-183. DOI: https://doi.org/10.1016/j.fbio.2018.02.008.

16. Sarbatova NYu, Potryasov NV. Soevaya okara v retsepturakh myasnykh i myasosoderzhashchikh izdeliy [Soy okara in the formulations of meat and meat-containing products]. Sovremennye aspekty proizvodstva i pererabotki selʹskokhozyaystvennoy produktsii - Sbornik statey po materialam II nauchno-prakticheskoy konferentsii studentov, aspirantov i molodykh uchenykh [Modern aspects of production and processing of agricultural products - Proceedings of the II scientific-practical conference of students, graduate students, and young scientists]; 2016; Krasnodar. Krasnodar: Kuban State Agrarian University; 2016. p. 157-160. (In Russ.).

17. Dezhatkina SV, Gubeidullina ZM, Muhytov AZ. Morphological composition of blood pigs when you add in the diet of soy okara. Scientific Notes Kazan Bauman State Academy of Veterinary Medicine. 2014;217(1):65-70. (In Russ.).

18. Dezhatkina SV, Lyubin NA, Dezhatkin ME. Parametres of calcium - phosphorus tissue metabolism of pigs, when feeding them with soy okara. Vestnik of Ulyanovsk State Agricultural Academy. 2017;38(2):76-79. (In Russ.). DOI: https://doi. org/10.18286/1816-4501-2017-2-76-79.

19. Vorotnikova IA, Dezhatkina SV. Turkey metabolism parametres in case of feeding them with modified zeolite and soy okara. Vestnik of Ulyanovsk State Agricultural Academy. 2019;48(4):161-164. (In Russ.). DOI: https://doi.org/10.18286/1816- 4501-2019-4-161-164.

20. Parrish DB, Waltking AE. Determination of vitamin E in foods - a review. CRC Critical Reviews in Food Science and Nutrition. 1980;13(2):161-187. DOI: https://doi.org/10.1080/10408398009527288. 21. Hayrulina TP, Semenova EA. The temperature and water stressors impact on the low-molecular antioxidant content in soya seeds. Bulletin of KSAU. 2013;77(2):22-26. (In Russ.).

21. Hayrulina, T. P. Deystvie temperaturnogo i vodnogo stressorov na soderzhanie nizkomolekulyarnyh antioksidantov v semenah soi / T. P. Hayrulina, E. A. Semenova // Vestnik Krasnoyarskogo gosudarstvennogo agrarnogo universiteta. - 2013. - T. 77, № 2. - S. 22-26.

22. Taghvaei M, Jafari SM. Application and stability of natural antioxidants in edible oils in order to substitute synthetic additives. Journal of Food Science and Technology. 2013;52(3):1272-1282. DOI: https://doi.org/10.1007/s13197-013-1080-1. 23. Sizova NV. The vitamin E content in edible and pharmaceutical oils. Chemistry of plant raw material. 2013;(1):157-163. (In Russ.). DOI: https://doi.org/10.14258/jcprm.1301157.

23. Sizova, N. V. Opredelenie tokoferolov kak lipidnyh antioksidantov v rastitel'nyh maslah i zhivotnyh zhirah / N. V. Sizova // Himiya rastitel'nogo syr'ya. - 2013. - № 1. - S. 157-163. DOI: https://doi.org/10.14258/jcprm.1301157.

24. Pycia K, Kapusta I, Jaworska G, Jankowska A. Antioxidant properties, profile of polyphenolic compounds and tocopherol content in various walnut (Juglans regia L.) varieties. European Food Research and Technology. 2018;245(3):607-616. DOI: https:// doi.org/10.1007/s00217-018-3184-3.

25. Voss GB, Osorio H, Valente MP, Pintado ME. Impact of thermal treatment and hydrolysis by Alcalase and Cynara cardunculus enzymes on the functional and nutritional value of Okara. Process Biochemistry. 2019;83:137-147. DOI: https://doi. org/10.1016/j.procbio.2019.05.010.

26. Zhu YP, Fan JF, Cheng YQ, Li LT. Improvement of the antioxidant activity of Chinese traditional fermented okara (Meitauza) using Bacillus subtilis B2. Food Control. 2008;19(7):654-661. DOI: https://doi.org/10.1016/j.foodcont.2007.07.009.

27. Ryabukha SS, Tymchouk SM, Pozdnyakov VV, Tertyshnyi AV. Content variability of to-copherols of different forms in soybean seeds. Oil crops. Scientific and technical Bulletin of VNIIMK. 2011;148-149(2):81-85. (In Russ.).

28. Kucherenko LA, Efimenko SG, Petibskaya VS, Prudnikova TN. Tokoferoly semyan soi [Soybean tocopherols]. News institutes of higher Education. Food technology. 2008;303-304(2-3):24-26. (In Russ.).

29. Prokhvatilova SS. Opredelenie vitamina E v farmatsevticheskikh preparatakh metodom VEHZHKH [HPLC determination of vitamin E in pharmaceuticals]. Farmatsiya. 1998;(3):41-44. (In Russ.).

30. Kishenko VA, Levshuk IV, Efimenko SG. Determination of tocopherols in oils and oil content products with the method of highly effective liquid chromatography. Oil crops. Scientific and technical Bulletin of VNIIMK. 2007;137(2):35-38. (In Russ.).

31. Tsochatzis ED, Tzimou-Tsitouridou R. Validated RP-HPLC method for simultaneous determination of tocopherols and tocotrienols in whole grain barley using matrix solid-phase dispersion. Food Analytical Methods. 2014;8(2):392-400. DOI: https:// doi.org/10.1007/s12161-014-9904-9.

32. Yang F, Yang CX, Yan XP. Post-synthetic modification of MIL-101(Cr) with pyridine for high-performance liquid chromatographic separation of tocopherols. Talanta. 2015;137:136-142. DOI: https://doi.org/10.1016/j.talanta.2015.01.022.

33. Zhuravleva LN. Svyazʹ mezhdu izomernym sostavom tokoferolov i dlitelʹnostʹyu frityurnogo zhareniya masel [Isomeric composition of tocopherols vs. deep frying time]. Nauchnoe obespechenie innovatsionnykh tekhnologiy proizvodstva i khraneniya selʹskokhozyaystvennoy i pishchevoy produktsii - Sbornik materialov II Vserossiyskoy nauchno-prakticheskoy konferentsii molodykh uchenykh i aspirantov [Scientific support for innovative technologies for the production and storage of agricultural and food products - Proceedings of the II All-Russian scientific and practical conference of young scientists and graduate students]; 2014; Krasnodar. Krasnodar: State All-Russian scientific research institute of tobacco, makhorka and tobacco products of All-Russian Academy of Agriculture; 2014. p. 147-149. (In Russ.).

34. Eshchenko AYu, Zenkevich IG. Determination of tocopherols and tocotrienols in plant oils and some features of their composition. Vestnik of Saint Petersburg University. Physics and Chemistry. 2006;(4):68-75. (In Russ.).

35. Osipov MV, Rudenko OS, Parashina FI, Petrova NA, Yuzhakova KV, Savenkova TV. Change of the content of vitamins in the manufacture and storage of flour confectionery products. Food Industry. 2018;(12):46-49. (In Russ.).

36. Skurikhin IM, Tutelʹyan VA. Khimicheskiy sostav rossiyskikh pishchevykh produktov: Spravochnik [Chemical composition of Russian food products: Manual]. Moscow: DeLi print; 2002. 236 p. (In Russ.).